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Tipo: Dissertação
Título: Imunolocalização de canais para sódio voltagem-dependentes em neurônios do núcleo coclear dorsal e do núcleo medial do corpo trapezoidal
Título(s) alternativo(s): Immunolocalization of voltage-gated sodium channels in neurons of the dorsal cochlear nucleus and the medial nucleus of the trapezoid body.
Autor: Silva, Liciane Mateus da 
Primeiro orientador: Rodrigues, Aldo Rogelis Aquiles
Resumo: O presente trabalho buscou caracterizar a expressão de canais para sódio voltagem-dependentes em neurônios do sistema auditivo inferior, mais especificamente no núcleo coclear dorsal (DCN) e no núcleo medial do corpo trapezoidal (MNTB) de ratos Wistar de 30 dias. Para isso, utilizou-se reações de imunofluorescência de dupla marcação, em fatias de 40 ou 150 µm do tronco cerebral e documentação em microscopia confocal. Foi utilizado um anticorpo que reconhece todas as isoformas de canais para sódio (PAN-Nav); anticorpos específicos contra as isoformas de canais para sódio ou cálcio voltagem-dependentes Nav1.1, Nav1.2 e Nav1.6 ou Cav3.2 e para os marcadores neuronais anti-Map-2 e anti-anquirina-G. Não foi observada a imunomarcação anti-Nav 1.1 e anti-Nav 1.2 nos dois núcleos analisados, pelo menos em densidades detectáveis, pelo método de imunofluorescência utilizado. O canal Nav1.6 é intensamente expresso nos segmentos iniciais do axônio (AIS) das células cartwheel, fusiformes e gigantes do DCN. As células cartwheel apresentaram uma área de silhueta somática média de 181,5 ± 16,3 (n=8), as fusiformes de 423,9 ± 43,6 (n=8) e as gigantes de 1119,3 ± 123,4 µm2 (n=3), enquanto a marcação anti-Nav1.6 ao longo do AIS exibiu uma extensão de 17,6 ± 0,5; 22,5 ±1,8; 45,3 ± 1,5 µm, respectivamente. Quando comparadas, tanto a área de silhueta somática quanto a extensão da marcação anti-Nav1.6 no AIS diferiram estatisticamente entre essas subpopulações neuronais do DCN. Nas células cartwheel do DCN, embora demonstrado a presença do canal Cav3.2 no soma e em processos próximos ao soma, não foi observada a colocalização desse canal com o Nav1.6 no AIS. Nas células principais do MNTB, a análise da marcação anti-PAN-Nav e anti-Nav1.6 ao longo do AIS, também não sugere a presença de outras isoformas, além da Nav1.6. Nesse domínio neuronal observou-se colocalização anti-Nav1.6 e anti-anquirina-G, onde apenas a marcação anti-Nav1.6 aumenta com a distância ao longo do AIS. Dessa forma, nossos dados sugerem que a alta densidade da isoforma Nav1.6 no AIS é comum a distintos neurônios auditivos. Entretanto, a extensão de sua expressão no provável sítio gerador do potencial de ação difere entre distintas populações neuronais do sistema auditivo. Além do canal para sódio Nav1.6, as células cartwheel do DCN exibiram uma expressão somática do canal de cálcio Cav3.2 e ambos canais iônicos voltagem-dependentes podem estar envolvidos com potenciais de ação complexos característicos desses neurônios.
Resumo: The present study aimed to characterize the expression of voltage-gated sodium channels in neurons of inferior auditory system, more specifically at dorsal cochlear nucleus (DCN) and medial nucleus of trapezoid body (MNTB) of thirty days rats. For this purpose, double-labeling immunofluorescence reactions m of brain stem and documented usingwere done in slices of 40 or 150 confocal microscopy. We have used an antibody that recognizes all the isoforms of sodium channels (PAN-Nav), specific antibodies against the isoforms of voltage-dependent sodium or calcium channels Nav1.1, Nav1.2 e Nav1.6 or Cav3.2, and also antibodies against the neuronal markers anti-Map-2 e anti-ankyrin-G. It was not observed anti-Nav1.1 or Nav1.2 labeled neurons from both nuclei evaluated, at least at densities normally detected through the immunofluorescence technique utilized. The Nav1.6 channels are highly expressed at axon initial segments (AIS) of cartwheel, fusiforms and giant cells of DCN. The cartwheel cells showed a mean somatic silhouette area of 181,5 ± 16,3 (n=8), the fusiforms of 423,9 ± 43,6 (n=8) and the giant cells of 1119,3 ± 123,4 µm2 (n=3), whereas the anti-Nav1.6 labeling along the AIS measured 17,6 ± 0,5; 22,5 ±1,8; 45,3 ± 1,5 µm, respectively. When compared, both the somatic silhouette area and the extension of anti-Nav1.6 at AIS, presented a statistically significant difference between the neuronal subpopulations of DCN. At cartwheel cells from DCN, the Cav3.2 calcium channel is observed in the soma and also in processes near the soma, although the colocalization of this channel with the Nav1.6 at AIS was not detected. At MNTB principal cells, the analysis of anti-Pan and anti-Nav1.6 along the AIS, also does not suggest the presence of other isoforms besides the Nav1.6. At this neuronal domain we observed the colocalizaion of anti-Nav1.6 e anti-ankyrin-G, where only the anti-Nav1.6 labeling increases with the distance along the AIS. Therefore, our data suggest that the high density of Nav1.6 isoform at AIS is a common finding of auditory neurons. However, the extension of its expression at the probable site of the action potential generation differs between neuronal populations of auditory neurons. Besides the Nav1.6, the cartwheel cells of DCN exhibited a somatic expression of Cav3.2 calcium channel and both voltage-gated ion channels may be involved with complex action potential characteristic of these neurons.
Palavras-chave: Canais para sódio
Nav1.6
Axônios
Núcleo coclear dorsal
Núcleo medial do corpo trapezoidal
Anquirina-
Geração de potenciais de ação
Sistema auditivo
Sodium channels
Nav1.6 sodium channels
Axon
Dorsal cochlear nucleus
Medial nucleus of the trapezoidal body
Ankyrin-G
Action potential generation
Auditory system
Área do CNPQ: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA
Idioma: por
País: BR
Editora / Evento / Instituição: Universidade Federal do Triângulo Mineiro
Sigla da instituição: UFTM
Departamento: Bioquímica, Fisiologia e Farmacologia
Programa: Curso de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas
Citação: SILVA, Liciane Mateus da. Immunolocalization of voltage-gated sodium channels in neurons of the dorsal cochlear nucleus and the medial nucleus of the trapezoid body.. 2013. 79 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica, Fisiologia e Farmacologia) - Universidade Federal do Triângulo Mineiro, Uberaba, 2013.
Tipo de Acesso: Acesso Embargado
Data do documento: 5-Apr-2013
Appears in Collections:Programa de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas

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